Papaya meleira virus (PMeV) é o agente etiológico da meleira do mamoeiro (Carica papaya L.), cujo diagnóstico é feito através da detecção do RNA dupla-fita (dsRNA) viral a partir do látex das plantas. Neste trabalho é demonstrado que o dsRNA do PMeV é protegido durante 25 dias quando diluído em tampão citrato pH 5.0 (1:1 v/v) seguido de armazenamento à -20°C. Nesta mesma temperatura, o dsRNA foi parcialmente protegido quando o látex foi diluído em água ultra-pura ou mantido puro. Ao contrário, quando as amostras foram mantidas à 25°C, observou-se uma degradação progressiva do dsRNA, com ausência de bandas após 25 dias, indicando a necessidade do congelamento do látex. Os procedimentos de coleta e armazenamento do látex descritos neste trabalho contribuem para a eficiência e uso em larga escala do diagnóstico molecular do PMeV.

Papaya meleira virus (PMeV) is the causal agent of papaya (Carica papaya L.) sticky disease, which has been detected through analysis of its double-stranded RNA (dsRNA) genome from plant latex. In this work we demonstrate that PMeV dsRNA is protected during 25 days when latex is diluted in citrate buffer pH 5.0 (1:1 v/v) and maintained at -20°C. At the same temperature, some protection was observed for pure latex or latex diluted in ultra-pure water. Conversely, the dsRNA was almost completely degraded after 25 days when maintained at 25°C, indicating the need for freezing. The proper procedures to collect and store papaya latex described here will contribute to efficient and large scale use of molecular diagnosis of PMeV.

A diagnose da meleira do mamoeiro (Carica papaya)tem sido feita mediante observação de sintomas que aparecem principalmente nos frutos ou pela detecção de dsRNA de cerca de 12 kb, purificado a partir do látex em coluna de CF11, em gel de agarose ou poliacrilamida. Os sintomas nos frutos são tardios e permitem longa permanência de plantas infectadas no campo e o processo usado para detectar dsRNA é laborioso, não se prestando a detecção em larga escala. Visando disponibilizar protocolos de diagnose precoce da meleira que possam ser usados em larga escala, o presente trabalho apresenta dois métodos de detecção relativamente baratos, rápidos e que permitem o manuseio de dezenas de amostras por dia. Os dois métodos utilizam o látex extraído dos frutos, folhas ou caule de plantas, e se baseiam na extração e visualização de ácidos nucléicos. A presença do vírus é confirmada pela visualização do seu dsRNA em gel de agarose (1%) em 1X TBE. Com esta técnica temos conseguido resultados confiáveis a ponto de diagnosticar precocemente a meleira em plantas ainda jovens e em plantas assintomáticas.

Papaya sticky disease was first reported affecting papaya (Carica papaya) in Brazil in the late 80s. Today this disease is found in the papaya production areas throughout Brazil, and in some of them it became the main limiting factor for the papaya industry. The primary disease symptom is an excessive exudation of highly fluid latex that becomes dark as result of oxidation and turns the fruit unmarketable. It is caused by a new virus that has an isometric particle (40-50 nm in diameter), and a unique 12 kb long dsRNA molecule. Since its diagnosis is done mainly by observation of the symptoms on the fruit, infected plants may be source of inoculum for several months before diagnosis. Another form of diagnosis is the detection of dsRNA from leaves and latex using CF11 columns. This is a laborious system not suited to large scale usage. The present work presents two cheap and fast diagnostic protocols. These protocols use latex obtained from fruits, leaves and stems, and are based on the extraction and visualization of nucleic acids. Presence of the virus is confirmed by the visualization of dsRNA on agarose (1%) gel in 1X TBE. Using these protocols it is possible to confirm the presence of the virus in young and assymptomatic plants.

Realizaram-se três experimentos, em Linhares-ES, de controle do oídio (Ovulariopsis sp.) do mamoeiro (Carica papaya). A severidade da doença foi estimada usando escala de notas de 0 a 4. Em casa de vegetação, utilizaram-se mudas de 'Improved Sunrise Solo Line 72/12', em delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos e cinco repetições. Foram feitas três pulverizações de triflumizole (150, 225 e 300 mg.l-1 i.a.), enxofre (1560 mg.l-1 i.a.) e tiofanato metílico (700 mg.l-1 i.a) e quatro avaliações da severidade da doença a intervalos semanais. Em campo, realizaram-se dois experimentos com o 'Baixinho de Santa Amália', tendo delineamento em blocos casualizados e quatro repetições. Foram feitas cinco pulverizações, a intervalos bissemanais e cinco avaliações da severidade da doença, sendo uma previamente e as demais aos 21, 35, 49 e 63 dias após a primeira pulverização. Em casa de vegetação, todos os produtos reduziram a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Triflumizole foi mais eficiente, não tendo diferenças entre suas doses. No primeiro experimento de campo, enxofre (1560 mg.l-1 i.a.) e bicarbonato de sódio (2000 mg.l-1) foram os produtos mais eficientes na redução da AACPD, seguidos por triflumizole, que não apresentou diferenças entre as doses aplicadas (150, 225 e 300 mg.l-1 i.a.). Tiofanato metílico (700 mg.l-1 i.a.) não diferiu da testemunha. No segundo experimento, azoxystrobin (20 a 100 mg.l-1 i.a.) aplicado a cada 14 ou 28 dias, com ou sem adjuvante-molhante, e enxofre (1560 mg.l-1 i.a.) não reduziram a AACPD. Este trabalho mostrou a possibilidade de utilização de enxofre e de bicarbonato de sódio no controle do oídio do mamoeiro.

Three trials were conducted in Linhares county to study the chemical control of papaya (Carica papaya) powdery mildew (Ovulariopsis sp.). In all trials disease severity was visually estimated using a scale from 0 to 4. In the greenhouse, a trial was arranged in a completely randomised design with five replications using 'Improved Sunrise Solo Line 72/12'. Three sprays of triflumizole (150, 225, and 300 mg.l-1 a.i.), sulphur (1560 mg.l-1 a.i.) and methyl thiophanate (700 mg.l-1 a.i.) were evaluated at seven-day intervals during four weeks. The other two trials were carried out in an orchard of cv. Baixinho de Santa Amália, using a completely randomised block design with four replications. In each trial, five biweekly sprays and five evaluations were done: one before the first spray and the others 21, 35, 49, and 63 days after the first spray. In the greenhouse, all treatments differed from the control in relation to the area under the disease progress curve (AUDPC). Triflumizole was the most efficient fungicide. In the first field trial the most efficient fungicides in reducing the AUDPC were sodium bicarbonate (2000 mg.l-1 a.i.) and sulphur (1560 mg.l-1 a.i.) followed by triflumizole (150 to 300 mg.l-1 a.i.). Methyl tiophanate (700 mg.l-1 i.a.) did not differ from the control treatment. In the second field trial, azoxystrobin (20 to 100 mg.l-1 a.i.) applied at 14 or 28-day intervals, with or without adjuvant, and sulphur (1560 mg.l-1 a.i.) did not decrease the AUDPC. The results revealed the possibility of using sulphur and sodium bicarbonate to control papaya powdery mildew in the field.

A podridão peduncular (PP) e a antracnose são as principais doenças pós-colheita do mamão (Carica papaya). Avaliou-se o efeito de 11 tratamentos (mg.l-1 i.a.) em seu controle: 1-chlorothalonil PM (1500); 2-chlorothalonil SC (2000); 3-chlorothalonil + oxicloreto de cobre PM (875 + 1050); 4-tiofanato metílico + chlorothalonil PM (400 + 1000); 5-tiofanato metílico PM (700); 6-tolylfluanid PM (750); 7-tebuconazole CE (200); 8-triadimenol CE (250); 9-fluazinam SC (500); 10-iminoctadine F (300) e 11-testemunha. Utilizou-se delineamento em blocos casualizados com quatro repetições e oito plantas / parcela, em pomar de 'Improved Sunrise Solo Line 72/12', em Linhares-ES. De março de 1997 até março de 1998, realizaram-se pulverizações bissemanal a mensalmente e, a partir de setembro, 12 colheitas de nove frutos / parcela. Dez a 12 dias após a colheita, avaliou-se a incidência da antracnose e da PP e a severidade da antracnose, com o uso de escala de notas de 0 a 4. A incidência da antracnose variou de 68,5 a 100% na testemunha. A correlação entre incidência e severidade da antracnose foi alta (r = 0,86). O uso de fungicidas não reduziu a incidência de PP. Exceto os tratamentos 7 e 8, os demais reduziram 26,4 a 41,2% a média geral da incidência de antracnose, em relação à testemunha. Não houve interação entre tratamentos e épocas de avaliação. Houve redução de até 73,6% da incidência de antracnose. A maior incidência da antracnose e a menor eficiência dos fungicidas ocorreu de novembro a 15 de janeiro, quando ocorreu maior quantidade de chuva (505 mm em 16 dias).

Anthracnose and stem-end rot (SER) are the main post harvest diseases of papaya (Carica papaya) in Brazil. The effectiveness of 11 treatments (mg.l-1 a.i.) on the their control was evaluated: 1-chlorothalonil WP (1500); 2-chlorothalonil SC (2000); 3-chlorothalonil + copper oxychloride WP (875 + 1050); 4-thiofanate-metil + chlorothalonil WP (400 + 1000); 5- thiofanate-metil WP (700); 6-tolylfluanid WP (750); 7-tebuconazole EC (200); 8-triadimenol EC (250); 9-fluazinam SC (500); 10-iminoctadine F (300) and 11-unsprayed control. A trial was arranged in a completely randomized block design with four replications and eight plants / plot, using 'Improved Sunrise Solo Line 72/12', in Linhares-ES. From the beginning of flowering (March 1997) to March 1998, biweekly to monthlly sprays were applied. From September on, 12 harvests of nine fruits/plot were accomplished. Ten to 12 days after the harvest, the incidence of anthracnose and SER was evaluated and the severity of anthracnose was estimated visually using a scale from 0 to 4. The correlation between incidence and severity of anthracnose was high (r = 0,86). The use of fungicides did not reduce the incidence of SER. Except for treatments 7 and 8, the average incidence was reduced from 26,4 to 41,2% compared to unsprayed controls. On the third day of evaluation fungicides reduced the anthracnose incidence up to 73,6%. The highest anthracnose incidence and the lowest degree of fungicide effectiveness occurred between November and January 15th, which correspond to the highest rain frequency (505 mm in 16 days).

Mudas das cultivares de abacaxi (Ananas comosus) 'Pérola' (suscetível) e 'Primavera' (resistente) foram inoculadas em casa de vegetação com isolados de Fusarium subglutinans f. sp ananas, resistentes e sensíveis ao benomyl, de diferentes áreas produtoras de abacaxi do Espírito Santo, visando estudar a virulência do patógeno. Foi utilizada suspensão de conídios obtidos pela raspagem da superfície das colônias desenvolvidas em meio BDA, cuja concentração final foi 10(5) conídios/ml. A inoculação de F. subglutinans f. sp ananas foi efetuada pela imersão de mudas injuriadas mecanicamente na base, com três meses de idade, na suspensão de inóculo. Dos 22 isolados testados preliminarmente, selecionou-se oito de F. subglutinans f. sp ananas, sendo quatro representativos do grupo dos sensíveis ao benomyl (E285, E277, E278 e E290) e quatro representativos do grupo dos resistentes ao benomyl (E272, E274, E279 e E283) para realização do teste final. Os resultados comprovaram a resistência da cv. Primavera a todos os isolados testados. Plantas da cv. Pérola apresentaram sintomas da doença aos 15 dias após a inoculação com isolados resistentes ao benomyl; os isolados sensíveis ao benomyl só foram capazes de causar sintomas severos da doença aos 45 e 60 dias após a inoculação. O isolado E272, resistente ao benomyl, foi o mais virulento, tendo causado a maior lesão e a morte das plantas aos 30 dias após a inoculação; os isolados E277 e E278 foram os mais virulentos. Houve diferenças em virulência de isolados de F. subglutinans f. sp. ananas resistentes e sensíveis ao benomyl ao abacaxizeiro.

Out of 22 isolates of Fusarium subglutinans f. sp. ananas tested in preliminar trials, it was selected for the final experiment four isolates representing the resistant group (E272, E274, E279 e E283), and four representing the susceptible group (E285, E277, E278 e E290) of Fusarium subglutinans f. sp. ananas to benomyl. The isolates were collected on diseased pineapple plants from the southern area of the Espírito Santo State, and inoculated on three months old pineapple (Ananas comosus) seedlings, cv. Perola (susceptible) and Primavera (resistant), under greenhouse conditions, to study the virulence of the pathogen. The pineapple seedlings were inoculated by immersion of the seedlings in a conidial suspension (10(5) conidia/ml) scratched from PDA plates, after they had been injured on their crown area. The results showed that the cv. Primavera was resistant to all isolates tested. The cv. Perola showed symptoms of fusariosis 15 days after the inoculation with the isolates resistant to benomyl. The isolates susceptible to benomyl caused symptom of the disease 45 days after the inoculation. The isolate E272 (resistant to benomyl) was the most virulent isolate to cv. Perola, whereas the isolates E277 and E278 (susceptible) to benomyl were the least virulent. The susceptible isolates to benomyl caused symptoms of the disease on the cv. Perola 45 and 60 days after the inoculation. In conclusion this study showed that there are differences in virulence between the isolates of F. subglutinans f. sp. ananas resistant and susceptible to benomyl to pineapple.